Святые на иконе изображены в предстоянии одной из прославленных святынь – иконе "Богоматерь Владимирская" из ростовского Успенского собора. По преданию, икона была привезена в Ростов из Киева князем Владимиром Мономахом. В "Печерском патерике" помещен рассказ о чудесном создании иконы знаменитым иконописцем Киевской Руси монахом Печерского монастыря Алимпием. Икона «сохранилась невредимою при великих пожарах 1160, 1213, 1408 года, при падении первого каменного храма и при грабительских набегах татар и "ляхов"» (Толстой М.В. Древние святыни Ростова Великого. – М.: 1860. – С. 30–31).

В центре композиции изображен в святительских одеяниях Николай Чудотворец. К нему – воплощенному идеалу христианского пастыря – обращены стоящие по сторонам от него ростовские святые – мученики, преподобные, юродивые и святители. Слева от Николая изображены епископы Леонтий и Исайя, митрополит Дмитрий, архимандрит Авраамий, Исидор Юродивый, Иринарх затворник, преподобный Сергий Радонежский (происходящий из Ростова). Справа от Николая: епископы Игнатий и Иаков, архиепископ Феодор, преподобный Петр царевич ордынский, юродивые Иоанн Милостивый и Иоанн Московский, князь-мученик Василько ( Василий Константинович). Все они, за исключением чудотворца Сергия и Иоанна Московского, были похоронены в ростовском Успенском соборе и других храмах города.

Композиции подобного типа были широко распространены в XVIII–XIX вв. В них особенно явно выражена тема внутреннего единства всех предстоящих, какого бы рода христианские подвиги они ни совершали и в какую бы эпоху ни жили. Выпадало ли мученичество ростовских чудотворцев на времена татаро-монгольского завоевания, или Смуты начала XVII столетия, прославлялись ли они обращением язычников или строительством храмов и монастырей, над ними был распростерт покров Богородицы. В изображении святых Ростова Великого, предстоящих образу Богоматери, выражена идея нерасторжимости истории Русского государства и русской церкви. Ирина Сосновцева // «Пречистому образу Твоему поклоняемся...». Образ Богоматери в произведениях из собрания Русского музея. СПб. 1995. С. 230.